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科技创新

染色涂片的制备步骤

在干净的玻片上,将固体培养基上生长的细菌按照以下方法制作涂片:

(1) 用蜡笔将玻片分成几部分,每部分涂一个菌。

(2) 每部分用接种环加少量的无菌水。

(3) 垂直拿住接种环在酒精灯外焰上加热直到整个接种丝烧红。

(4) 等待接种环冷却。

(5) 像拿笔一样握住接种环,沾取少量菌株,注意避免沾到琼脂,

(6) 将菌株转移到玻片的水滴上,用接种环平面乳化后将其在划分的区域内涂抹均 匀。注意要涂抹得又薄又匀,但也要避免涂抹得太薄以至于干燥后无法观察。单个菌落 在显微镜下容易观察。如果菌株没冇均勻的涂抹开,而是聚在一起,应该弃置,重新涂片。

(7)将接种环灭菌。

(8)用同样的方式制备其他涂片。

(9)玻片在空气中晾干,在酒精灯火焰上快速过两次使细胞凝结并牢固地固定在玻片上

涂抹液体培养基中的细菌涂片应采用同样的方法,只是不需要准备稀释液。培养基 中成分和杂质的存在会造成涂片不干净。如果液体培养基中含糖量较髙(如乳酸菌培养 基),在固定玻片时要适当延长加热时间,避免在冲冼玻片时因糖的溶解而将细菌冲洗掉。

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